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| 22.09.2021 | |||
| 20:45 | OSS '20 | 2-1 | HSC '21 |
| 20:00 | ADO '20 | 2-1 | Koninklijke HFC |
| 20:00 | Gemert | 3-1 | SV TEC |
| 20:00 | GVV Unitas | 1-0 | Ter Leede |
| 20:00 | Kozakken Boys | 2-0 | Groene Ster |
| 20:00 | OFC Oostzaan | 0-2 AET | Excelsior Maassluis |
| 20:00 | Spakenburg | 5-2 | VV UNA |
| 20:00 | Staphorst | 3-1 | Dongen |
| 20:00 | USV Hercules | 1-1/p.3-4 | ACV Assen |
| 20:00 | VV Hoogland | 0-1 | RKVV Westlandia |
| 21.09.2021 | |||
| 20:00 | Achilles Veen | 3-2 AET | DTS '35 |
| 20:00 | AFC Ajax Amat. | 4-1 | VVSB |