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| 28.10.2021 | |||
| 21:00 | RKC Waalwijk | 3-0 | Willem II Tilburg |
| 18:45 | AFC Ajax Amat. | 0-5 | SC Cambuur |
| 27.10.2021 | |||
| 21:00 | FC Groningen | 4-0 | Helmond Sport |
| 20:00 | Achilles Veen | 4-0 | GVV Unitas |
| 20:00 | ADO '20 | 2-3 AET | BVV Barendrecht |
| 20:00 | AFC Amsterdam | 1-2 | SC Heerenveen |
| 20:00 | Almere City FC | 0-2 | Go Ahead Eagles |
| 20:00 | Capelle | 0-3 | NEC Nijmegen |
| 20:00 | De Treffers | 2-2/p.6-5 | Rijnsburgse Boys |
| 20:00 | Fortuna Sittard | 3-0 | TOP Oss |
| 20:00 | GVVV | 0-2 | Sparta Rotterdam |
| 20:00 | Harkemase Boys | 2-1 AET | DOVO |
| 20:00 | IJsselmeervogels | 0-3 | SBV Excelsior |
| 20:00 | RKVV Westlandia | 2-5 | Excelsior Maassluis |
| 20:00 | Staphorst | 0-3 | Gemert |
| 18:45 | OSS '20 | 0-2 | FC Twente |
| 26.10.2021 | |||
| 21:00 | NAC Breda | 1-1/p.4-2 | VVV Venlo |
| 20:00 | ACV Assen | 0-3 | MVV Maastricht |
| 20:00 | ASWH | 1-3 | Heracles Almelo |
| 20:00 | DVS '33 | 2-1 | FC Eindhoven |
| 20:00 | FC Volendam | 0-3 | FC Emmen |
| 20:00 | Kozakken Boys | 1-2 AET | SC Telstar |
| 20:00 | PEC Zwolle | 4-1 | De Graafschap |
| 20:00 | Roda Kerkrade | 2-1 | FC Den Bosch |
| 20:00 | Spakenburg | 3-0 | FC Dordrecht |
| 20:00 | Sparta Nijkerk | 0-2 | ADO Den Haag |
| 18:45 | SteDoCo | 0-5 | FC Utrecht |