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| 05.08.2009 | |||
| 17:00 | AFC Nove Mesto | 1-1/p.5-3 | Spartak Vrable |
| 17:00 | FK Ruzinov | 0-3 | FK Rača Bratislava |
| 17:00 | FKS Nemsova | 0-0/p.3-5 | Moravany n. V. |
| 17:00 | Liptovsky Mikulas | 1-0 | Dolny Kubin |
| 17:00 | Lokomotiva Zvolen | 0-0/p.2-4 | MFK Banska Bystrica |
| 17:00 | MFK Snina | 4-2 | SK Odeva Lipany |
| 17:00 | MFK Vranov | 3-5 | FK Bodva |
| 17:00 | MFK Vrbove | 2-0 | Slovan Duslo Sala |
| 17:00 | SK Bernolakovo | 1-3 | AS Trenčín |
| 17:00 | SK Blava JB | 0-0/p.3-4 | Spartak Myjava |
| 17:00 | SKF Sered | 1-1/p.6-5 | FK Puchov |
| 17:00 | Slavoj Trebisov | 0-2 | Sport Podbrezova |
| 17:00 | Sokol Dolna Zdana | 2-2/p.5-6 | Rimavska Sobota |
| 17:00 | Spisska Nova Ves | 1-1/p.4-2 | Zemplin Michalovce |
| 04.08.2009 | |||
| 17:00 | FKM Nove Zamky | 0-1 | FKM Prievidza |
| 17:00 | Goral Stara Lubovna | 0-3 | LAFC Lucenec |
| 17:00 | Topvar Topolcany | 2-3 | Zlate Moravce |