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| 14.09.2021 | |||
| 16:30 | Velke Mezirici | 0-5 | Opava |
| 08.09.2021 | |||
| 17:00 | FK Chlumec | 0-1 AET | MFK Chrudim |
| 17:00 | MFK Vítkovice | 0-3 | Fotbal Trinec |
| 16:00 | Loko Vltavin | 3-2 | Usti nad Labem |
| 07.09.2021 | |||
| 17:00 | Banik Most Sous | 0-1 | Pribram |
| 02.09.2021 | |||
| 17:00 | SK Zápy | 1-1/p.4-2 | Viktoria Zizkov |
| 01.09.2021 | |||
| 17:00 | FK Blansko | 1-4 | FK Zlin |
| 17:00 | Olympie Brezova | 0-2 | Hradec Kralove |
| 17:00 | SK Sparta Kolín | 1-2 | Dukla Praha |
| 17:00 | Viktorie Přerov | 0-2 | SK Lisen |
| 25.08.2021 | |||
| 18:30 | Slovan Liberec | 1-2 | FK Zbuzany |
| 18:00 | Povltavska FA | 0-5 | FK Varnsdorf |