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| 29.10.2009 | |||
| 20:45 | FC Dordrecht | 1-2 AET | AFC Ajax |
| 28.10.2009 | |||
| 20:45 | Roda Kerkrade | 0-2 | PSV Eindhoven |
| 20:00 | AZ Alkmaar | 5-2 AET | Spakenburg |
| 20:00 | FC Twente | 3-0 | Capelle |
| 20:00 | Gemert | 2-2/p.3-4 | WHC Wezep |
| 20:00 | NEC Nijmegen | 2-1 AET | SBV Excelsior |
| 20:00 | SC Heerenveen | 4-2 | RBC Roosendal |
| 20:00 | Vitesse Arnhem | 1-5 | FC Groningen |
| 20:00 | VV Baronie | 1-0 AET | Excelsior Maassluis |
| 27.10.2009 | |||
| 20:45 | Feyenoord | 2-0 | FC Den Bosch |
| 20:00 | De Treffers | 1-6 | NAC Breda |
| 20:00 | Go Ahead Eagles | 4-2 AET | FC Emmen |
| 20:00 | Helmond Sport | 5-0 | ASWH |
| 20:00 | Heracles Almelo | 3-0 | HFC Haarlem |
| 20:00 | Jong De Graafschap | 1-0 AET | FC Zwolle |
| 20:00 | Sparta Rotterdam | 1-1/p.5-4 | VVV Venlo |