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| 14.03.2010 | |||
| 05:00 | Blaublitz Akita | 2-0 | Arte Takasaki |
| 05:00 | Gainare Tottori | 3-0 | Matsumoto Yamaga |
| 05:00 | Honda FC | 0-1 | FC Ryukyu |
| 05:00 | Sagawa Printing | 2-2 | Ryutsu Keizai Univ |
| 05:00 | Sagawa Shiga | 1-1 | Machida Zelvia |
| 05:00 | Sony Sendai | 0-0 | Tochigi Uva |
| 05:00 | V-Varen Nagasaki | 2-0 | Honda Lock SC |
| 05:00 | Yokogawa Musashino | 3-2 | Zweigen Kanazawa |