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| 16.09.2009 | |||
| 21:00 | Mérida UD | 1-1/p.5-4 | CF Reus Deportiu* |
| 09.09.2009 | |||
| 21:30 | CA Ceuta | 2-2/p.4-5 | Alicante CF |
| 03.09.2009 | |||
| 21:00 | CD Numancia | 2-3 | Real Murcia |
| 02.09.2009 | |||
| 22:00 | UD Las Palmas | 2-1 | Cádiz CF |
| 21:30 | Albacete Balompié | 0-1 | Hércules CF |
| 21:30 | FC Cartagena | 3-2 AET | Elche CF |
| 21:00 | AD Alcorcón | 2-0 | CF Palencia |
| 21:00 | Atlético Ciudad | 3-2 | Real Oviedo |
| 21:00 | CD Alcoyano | 2-0 | Villajoyosa |
| 21:00 | CD Puertollano | 3-0 | Zamora CF |
| 21:00 | Girona FC | 1-0 | Gimnàstic Tarragona |
| 21:00 | Levante UD | 0-0/p.3-4 | SD Huesca |